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PCR反應(yīng)產(chǎn)物量過少分析

日期:2025-05-08 11:53
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摘要: PCR反應(yīng)產(chǎn)物量過少分析: (1)退火溫度不合適。以2度為梯度設(shè)計(jì)梯度PCR反應(yīng)優(yōu)化退火溫度。 (2)DNA模板量太少。增加DNA模板量。 (3)PCR循環(huán)數(shù)不足。增加反應(yīng)循環(huán)數(shù)。 (4)引物量不足。增加體系中引物含量。 (5)延伸時(shí)間太短。以1kb/分鐘的原則設(shè)置延伸時(shí)間。 (6)變性時(shí)間過長。變性時(shí)間過長會(huì)導(dǎo)致DNA聚合酶失活。 (7)DNA模板中存在抑制劑。確保DNA模板干凈

 PCR反應(yīng)產(chǎn)物量過少分析:

(1)退火溫度不合適。以2度為梯度設(shè)計(jì)梯度PCR反應(yīng)優(yōu)化退火溫度。

(2)DNA模板量太少。增加DNA模板量。

(3)PCR循環(huán)數(shù)不足。增加反應(yīng)循環(huán)數(shù)。

(4)引物量不足。增加體系中引物含量。

(5)延伸時(shí)間太短。以1kb/分鐘的原則設(shè)置延伸時(shí)間。

(6)變性時(shí)間過長。變性時(shí)間過長會(huì)導(dǎo)致DNA聚合酶失活。

(7)DNA模板中存在抑制劑。確保DNA模板干凈



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